Diskusní fórum serveru cshl.cz

sedimentační komůrka - likvor
no imageAutor: JanaVac
Datum: 28. 09. 2017, 19:39:41

Dobrý den,
dlouhodobě máme potíže s nízkou buněčností preparátů z likvorů zpracovávaných v cytospinu (Cytospin 4). Mohla bych požádat o vaše zkušenosti, jak zpracováváte likvor u vás?

A ještě jeden dotaz - je někdo, kdo nepoužívá a mohl by zapůjčit na cca měsíc Saykovu komůrku?

Děkuji
Jana

Odpovědět

Re: sedimentační komůrka - likvor
no imageAutor: simkovaj
Datum: 01. 11. 2017, 17:53:11

Dobrý den paní Jano,
pracuji v laboratoři zabývající se převážně likvory.
Také děláme cytocentrifugaci, ale točíme 5 min. při 1100 ot/min. Více otáček skutečně buňky ničí. Opakovanou centrifugaci (tj. práci se sedimentem) jsem sice nezkoušela, ale vzhledem k tomu, že jsou buňky v CSF v hypoonkotickém prostředí opravdu křehké, bych se toho celkem obávala.
Závisí hodně také na množství stáčeného likvoru. U oligocelulárních likvorů točíme z 500 ul vzorku, u více jak 300 bb na 1 ul do komůrky max.300 a méně, u artef. krve je to více složité.
Nedoporučuji používat u oligocelulárních vzorků cytosedimentaci podle Němečkové, přišli byste i o to málo co v likvoru je.
Pokud byste měla jakékoliv dotazy, napište mi klidně do mailu (simkovaj@likvor.cz), ráda zodpovím, co budu vědět. Případně by se možná dala domluvit i nějaká stáž u nás na laboratoři, abyste viděla celý proces zpracování aby to i Vám chodilo dobře, pokud byste měla zájem.

S pozdravem Jitka

Odpovědět

Re: sedimentační komůrka - likvor
no imageAutor: Pavla Krystková
Datum: 17. 10. 2017, 10:00:35

Ahoj Jani,
likvory zpracováváme následovně: nejprve centrifugujeme likvor v centrifuze EBA 10 minut/1000 otáček, poté do cytospinu napipetujeme 0,5 ml sedimentu z EBA a opět centrifugujeme 10 min při 1000 otáčkách.
MUDr. Krpenský řekl, že se v literatuře uvádí, že se ve při vyšších otáčkách bb v likvoru rozbijí.

Odpovědět

Re: Re: sedimentační komůrka - likvor
no imageAutor: JanaVac
Datum: 02. 11. 2017, 06:49:07

Dobrý den,
oběma děkuji za cenné rady, vyzkoušíme!

Mějte se hezky
Jana

Odpovědět